BeaverBeads^? 人中性粒細胞分選試劑盒（陰選）適用于人外周血樣本中性粒細胞（CD16⁺CD66b⁺）的分選。將人外周血進行紅細胞裂解后，僅需25分鐘即可通過磁性分選獲得純度高達98%的人中性粒細胞。

產(chǎn)品特點

• 操作簡捷：無需分離柱，搭配磁性分離器25分鐘即可完成分選操作；

• 高純度：分選后中性粒細胞純度可達98%；

• 高活性：分選過程不影響細胞活性，可獲得無抗體標記的功能良好的中性粒細胞。


測評數(shù)據(jù)

使用BeaverBeads^? 人中性粒細胞分選試劑盒（陰選）從人外周血分選中性粒細胞，對分選后的中性粒細胞進行純度、活率及細胞功能分析：

1、細胞純度分析

用BeaverBeads^? 人中性粒細胞分選試劑盒（陰選）從人外周血分選中性粒細胞。分選前后的細胞用Alexa Fluor 647標記的anti-human CD66b抗體（克隆號6/40c）和FITC標記的anti-human CD16抗體（克隆號3G8）染色后進行流式細胞儀分析，分選前后的中性粒細胞純度分別為58.81 %和98.08 %。

圖1.流式檢測分選前后中性粒細胞純度

2、細胞活率分析

用BeaverBeads^? 人中性粒細胞分選試劑盒（陰選）從人外周血分選中性粒細胞。分選前后的細胞用7-AAD染色后進行流式細胞儀分析細胞活率。分選前活細胞比例為94.52%，分選后活細胞比例為96.29%。

圖2.流式檢測分選前后中性粒細胞活率

3、細胞功能學檢測

（1）ROS檢測

用BeaverBeads^? 人中性粒細胞分選試劑盒（陰選）從人外周血分選中性粒細胞，然后檢測PMA刺激后產(chǎn)生ROS的能力。37℃培養(yǎng)條件下，PMA刺激分選后的中性粒細胞10分鐘，通過流式細胞術檢測底物DCFH-DA（2’,7’-二氯二氫熒光素二乙酸酯）的氧化情況，以評估細胞內(nèi)ROS的生成能力。結果顯示，PMA刺激后中性粒細胞的ROS釋放水平較靜息狀態(tài)顯著升高。

圖3.流式分析中性粒細胞PMA刺激前后ROS的釋放水平

(2) 中性粒細胞表面蛋白CD66b表達檢測

使用BeaverBeads^? 人中性粒細胞分選試劑盒（陰選）從人外周血中分選中性粒細胞，將分選后的細胞經(jīng) PMA 刺激10分鐘或30分鐘后，通過流式細胞術檢測膜表面 CD66b 的表達水平。結果顯示，PMA刺激可顯著增強中性粒細胞CD66b的表達，且其表達水平隨刺激時間延長而逐漸上升。

圖4.流式分析中性粒細胞PMA刺激前后CD66b表達水平

4、競品分選對比

對比BeaverBeads^? 人中性粒細胞分選試劑盒（陰選）和競品試劑盒分選得到的中性粒細胞的純度、活率、得率和細胞功能。

（1）分別使用BeaverBeads^? 人中性粒細胞分選試劑盒（陰選）和競品試劑盒分選人外周血中性粒細胞，并對分選后的中性粒細胞進行純度檢測。結果顯示，使用BeaverBeads^? 人中性粒細胞分選試劑盒（陰選）分選得到的中性粒細胞（CD16⁺ CD66b⁺）純度高于對照競品組。

圖5.BEAVER試劑盒與對照試劑盒分選中性粒細胞純度比較

（2）分別使用BeaverBeads^? 人中性粒細胞分選試劑盒（陰選）和競品試劑盒分選人外周血中性粒細胞，對分選后的中性粒細胞進行活率分析。BeaverBeads^? 人中性粒細胞分選試劑盒（陰選）分選得到的中性粒細胞活率可達98.49%，與對照競品組相當。

圖6.BEAVER試劑盒與對照試劑盒分選中性粒細胞活率比較

（3）對比BeaverBeads^? 人中性粒細胞分選試劑盒（陰選）和競品試劑盒組分選中性粒細胞的得率，結果表明BeaverBeads^? 人中性粒細胞分選試劑盒（陰選）在中性粒細胞得率上優(yōu)于競品對照。

圖7.BEAVER試劑盒與對照試劑盒分選中性粒細胞得率比較

（4）分別使用BeaverBeads^? 人中性粒細胞分選試劑盒（陰選）和競品試劑盒分選人外周血中性粒細胞，對分選后中性粒細胞進行功能學檢測，分析PMA激活前后中性粒細胞膜表面CD66b的表達水平。結果顯示，BeaverBeads^? 人中性粒細胞分選試劑盒（陰選）分選得到的中性粒細胞功能良好，與競品對照組相似，經(jīng)PMA刺激后可顯著上調(diào)CD66b的表達水平。

圖8.BEAVER試劑盒與對照試劑盒分選中性粒細胞CD66b表達水平對比

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